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《大连理工大学》 2009年
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微藻抗菌活性物质的别离纯化

王芹  
【摘要】: 抗生素的耐药性约束了传统抗菌药物药效的发挥,从天然产品中寻觅、开发新的抗菌药物资源火烧眉毛。海洋微藻因为处于特别的成长环境,含有丰厚的生物活性物质,因而成为新式抗生素药物开发的重要潜在资源,一起微藻养分要求简略、易培育,具有巨大的开发潜力。 本研讨选用琼脂分散法测定了22种微藻不同溶剂提取物的抗菌活性,挑选出方针菌株一旋链角毛藻,并对其抗菌活性物质进行了别离纯化研讨。首要试验效果如下: 22种微藻粗提物显示出不同程度的抗菌活性,旋链角毛藻的提取物抗菌活性最强。旋链角毛藻的脂肪粗提物、多酚粗提物和萜类粗提物对供试菌株均有不同程度的成长按捺效果,开发旋链角毛藻中的抗菌物质具有广泛的远景。各种提取物对细菌的成长按捺效果遍及强于对真菌的成长按捺效果。 不同极性溶剂的脂肪粗提物中,石油醚提取物的抗菌谱最广;经过气相色谱法判定粗脂肪的脂肪酸含量与组成,发现只要石油醚提取物含有反式亚油酸、γ-亚麻酸和二十碳二烯酸等8种长链不饱满脂肪酸,因而估测脂肪粗提物中起抗菌效果的首要是这类弱极性多不饱满脂肪酸。石油醚提取物的抗菌活性遍及大于经硅胶柱层析得到4个别离组分的抗菌活性,这可能是因为有些抗菌活性是粗提物中多种脂肪族化合物一起效果的效果,或者是因为在层析、枯燥和用各种溶剂处理过程中部分抗菌化合物损失活性。 选用正交试验办法对粗多酚提取条件进行了优化,最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数80%,超声次数3次,料液比1:15 g/mL,超声时刻40 min。经过调查8种大孔吸附树脂对多酚提取物的吸附与解吸功能,挑选了一种合适开始别离多酚提取物的大孔吸附树脂AB-8,该树脂的吸附容量可达80.1%。建立了大孔吸附树脂柱层析开始别离多酚的办法,其最佳吸附条件为:料液浓度3 mg/mL,上柱流速2 mL/min,pH为6;最佳洗脱条件为:70%乙醇水溶液在4 mL/min的流速下对AB-8大孔树脂进行洗脱,得到组分CP。 使用硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶层析对CP进一步别离纯化,最终得到2个峰组分,别离命名为CPC-1和CPC-2。CPC-2具有较强的抗菌活性,该组分在酚浓度为1 mg/mL的条件下,对枯草芽胞杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为14.0±0.5 mm,对大肠杆菌和一般变形杆菌的抑菌圈直径到达16.0±0.8 mm,对真菌的按捺效果也有进步。CPC-2经结构判定,确认其为3,4,5-三羟基苯甲酸。
【学位颁发单位】:大连理工大学
【学位等级】:硕士
【学位颁发年份】:2009
【分类号】:Q946

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