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《云南中医学院》 2018年
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电针对NSCs移植治疗大鼠脑出血后不同时段NSCs分化作用的研究

肖雪妍  
【摘要】:目的:通过免疫荧光法检测神经干细胞在大鼠脑组织内增殖分化的情况,研究电针在神经干细胞移植治疗大鼠脑出血后不同介入时间点(6小时、12小时、24小时、48小时)对大鼠脑组织神经干细胞分化作用的影响。探讨电针在脑出血治疗中的最佳介入时间点,探析针刺联合神经干细胞移植治疗脑出血后神经系统修复再生的机理。方法:160只SD大鼠随机分为移植组、假手术组、模型组和移植电针组,各组按照电针治疗介入的时间分6小时亚组、12小时亚组、24小时亚组、48小时亚组,治疗时间均为两周。采用自体血注入法建立大鼠ICH模型,干预后利用Berderson评分评定行为学变化。分离、培养大鼠海马神经干细胞,经Nestin免疫荧光鉴定,Brdu标记;移植Brdu标记的神经干细胞于大鼠脑出血区,2w后处死,取全脑固定、制作冰冻切片、免疫荧光染色,NeuN、GFAP阳性细胞计数。结果:1.大鼠脑出血造模清醒后,模型组、移植电针组、移植组与假手术组对比,差异显著,有统计学意义(P0.05)。模型组、移植电针组、移植组,三组直接互相比较,没有明显差异,无统计学意义(P0.05)。2.大鼠GFAP阳性细胞数的变化及比较:大鼠脑组织免疫荧光染色后,假手术组、模型组、移植电针组、移植组均可见GFAP阳性细胞,同一时间点移植电针组的GFAP阳性细胞数均高于其它3组,组间比较有差异,差异有统计学意义(P0.05)。对移植电针组各时间点GFAP阳性细胞数进行比较,6h亚组数量最高,与12h、24h、4h这3个亚组相比无统计学意义(P0.05)。3.大鼠NeuN阳性细胞数的变化及比较:大鼠脑组织免疫荧光染色后,假手术组、模型组、移植电针组、移植组均可见NeuN阳性细胞,同一时间点移植电针组的NeuN阳性细胞数均高于其它3组,组间比较有差异,差异有统计学意义(P0.05)。对移植电针组各时间点NeuN阳性细胞数进行比较,48h亚组数量最高,与6h、12h、24h这3个亚组无统计学意义(P0.05)。结论:1.观察各组大鼠脑出血后的神经功能缺损程度,发现移植电针组可以明显改善大鼠脑出血后的神经行为学表现。2.6hGFAP的表达最高,48hNeuN的表达最高,电针对NSCs移植治疗大鼠脑出血后脑组织损伤具有修复作用,其机理可能是促进NSCs分化为神经元及神经胶质细胞。
【学位授予单位】:云南中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R245

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