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《陕西理工大学》 2019年
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银杏内酯B及其衍生物制备和对诱导型SH-SY5Y细胞生机影响研讨

赵正栋  
【摘要】:银杏内酯是银杏中一类重要的活性成分,具有抗炎、抗氧化、增殖效果,其间银杏内酯B(Ginkgolide B,GB)在神经维护方面效果明显。秦巴山区叶用银杏资源丰富、质量优秀,进步深加工水平、进一步延伸产业链具有重要意义。本文系统研讨了酶解法预处理制备银杏叶提取物、银杏内酯别离纯化、GB衍生物制备和对诱导型SH-SY5Y细胞生机的影响,效果如下:(1)经过单要素试验和正交试验对银杏叶酶解工艺进行了优化,最佳工艺为:复合酶(纤维素酶:果胶酶=1:1)用量为银杏叶的1/300(6.7×10~3U),温度50℃,时刻4.0 h,初始pH 5.0。此条件下酶解效果最佳,黄酮和内酯提取率别离为92.38%和91.74%。制得的银杏叶提取物总黄酮含量30.32%,总内酯含量8.85%,契合《我国药典》、《美国药典》、《欧洲药典》和《银杏叶提取物世界商务规范》中关于银杏叶提取物总黄酮≥24.0%,总内酯≥6.0%的含量要求。(2)以700g银杏叶提取物为质料,经过萃取、脱色、结晶和制备色谱纯化别离得到银杏内酯A(Ginkgolide A,GA)10.14 g,纯度98.36%,制备收率97.69%。银杏内酯B(Ginkgolide B,GB)3.11 g,纯度98.24%,制备收率96.26%。银杏内酯C(Ginkgolide C,GC)7.38 g,纯度99.01%,制备收率95.39%。银杏内酯J(Ginkgolide J,GJ)0.98 g,纯度98.57%,制备收率95.19%。白果内酯(Bilobalide,BB)6.70 g,纯度98.47%,制备收率97.51%。与现有文献比较显着进步了银杏内酯单体制备的功率和收率,具有较好的产业化使用远景。(3)将GB别离与肉桂酸、4-甲氧基肉桂酸、4-羟基肉桂酸和3,4-二甲氧基肉桂酸等经过C-10酯键缩合,高压制备色谱纯化得到了4个银杏内酯B衍生物,别离为化合物GBHC-1 48.6 mg,纯度98.23%,收率17.2%;化合物GBHC-2 54.2 mg,纯度98.38%,收率18.3%;化合物GBHC-3 45.7 mg,纯度97.12%,收率15.6%;化合物GBHC-4 39.9mg,纯度98.26%,收率12.8%。经核磁结构确证和SciFinder数据库检索证明这4个银杏内酯B衍生物为未经文献报导过的新化合物。(4)细胞试验效果表明10μmol/L GB,10μmol/L GBHC-1,10μmol/L GBHC-2,1μmol/L GBHC-3和10μmol/L GBHC-4对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞生机明显进步。GBHC-4效果稍优于其它化合物,但GB,GBHC-1,GBHC-2,GBHC-3,GBHC-4之间没有明显差异。
【学位颁发单位】:陕西理工大学
【学位等级】:硕士
【学位颁发年份】:2019
【分类号】:R284;R285

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