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《陕西理工大学》 2019年
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FGF13与SHCBP1在非小细胞肺癌A549细胞中的效果及机制研讨

尹美辰  
【摘要】:成纤维细胞生长因子(FGFs)对细胞的增殖、分解和凋亡起重要的调控效果,并广泛参加安排发育和再生进程。成纤维生长因子13(FGF13)作为FGFs亚宗族成员,近年来被发现在多种恶性肿瘤中表达上调,但是在非小细胞肺癌(NSCLC)中的效果和分子机制还有待清晰。本文首要探求了FGF13与SHCBP1对A549细胞增殖的影响及其分子调控机制。本研讨发现FGF13在A549细胞中有较高的表达水平,标明FGF13或许参加A549细胞增殖进程。因而,别离选用CCK-8、平板克隆构成和细胞免疫荧光试验进行检测。成果发现,下调FGF13的表达能够显着按捺A549细胞增殖,而超表达FGF13后成果与之相反。一起,下调FGF13的表达,Ki67蛋白的阳性率也会显着下降。这些成果证明FGF13与A549细胞增殖密切相关。此外,FGF13的搅扰导致A549细胞周期阻滞在G1/S期,相反超表达FGF13能够促进A549细胞周期G1/S期的转化。经过检测G1/S期相关蛋白,发现FGF13诱导的细胞周期阻滞与CyclinE、CDK2、P21和P27的表达有关。另一方面,FGF13能够经过激活AKT/gsk3α/gsk3β信号通路,促进A549细胞增增殖。已有研讨标明SHC SH2结构域连接蛋白1(SHCBP1)在多种癌安排中表达上调,并参加到癌症的发作开展进程中。结合本试验室前期酵母双杂交成果,猜想FGF13或许与SHCBP1存在相互效果。因而,选用直接免疫荧光共定位以及免疫共沉淀试验,证明FGF13和SHCBP1存在相互效果。进一步检测SHCBP1对A549细胞增殖的影响,成果发现超表达SHCBP1后,A549细胞生机没有显着性改变,Ki67蛋白的表达也无显着差异,阐明SHCBP1表达上调后对A549细胞的增殖没有显着性影响。但是FGF13与SHCBP1一起效果后,P21、P27和CyclinE1的表达量差异更显着。并且在SHCBP1高表达的情况下,FGF13发挥更好的促细胞增殖效果。综上所述,本研讨阐明晰FGF13与A549细胞增殖的联系,开始解析FGF13促进细胞增殖或许影响的信号通路和分子机制。清晰FGF13与SHCBP1的相互效果以及互作后对A549细胞增殖的调控效果。为FGF13作为NSCLC的临床确诊和靶向医治供给理论基础和试验根据。
【学位颁发单位】:陕西理工大学
【学位等级】:硕士
【学位颁发年份】:2019
【分类号】:R734.2

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