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《西北师范大学》 2016年
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锁阳多糖的别离纯化、结构、降糖活性及纳米钯组成使用研讨

王风霞  
【摘要】:锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)为锁阳科锁阳属植物的肉质茎,首要散布在甘肃河西走廊沙漠地带、内蒙古等地,储量丰厚,是我国的传统中药材,含有丰厚的多糖类物质。对锁阳多糖降血糖活性的研讨,将为开发多糖降血糖类药物供给参阅;对锁阳多糖提取物的研讨,也会对锁阳的全面开发和归纳使用发生积极影响。本论文在水提法的基础上,探究了盐提法、高温高压法提取工艺,别离纯化得到四种多糖组分;经过表征确认了其单糖组成和初级结构;经过树立Hep G2肝癌细胞胰岛素反抗模型,研讨了锁阳多糖改进Hep G2细胞胰岛素反抗的构效联系,调查了不同提取办法、不同分子量、含/不含游离蛋白的锁阳多糖对Hep G2细胞的毒性和降糖效果;使用链尿佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,调查了水提锁阳多糖对糖尿病大鼠的降血糖效果;最终以盐提锁阳多糖作为复原剂,在微波效果下制备钯纳米复合资料使用于血液中葡萄糖浓度检测。论文详细由以下五部分组成:榜首部分锁阳多糖的提取及别离纯化研讨使用水提法、盐提法、高温高压法提取了锁阳多糖,并优化了锁阳多糖纯化过程中关键过程—脱色办法,确认了最优脱色工艺为:多糖浓度2 mg m L-1,活性碳使用量为1%,40℃,p H为4。该条件下多糖保存率为76.45±0.67%,脱色率可到达86.84±2.10%。经脱色、脱蛋白、醇沉、透析、柱层析等纯化过程,得到分子量相对均一的四种锁阳多糖组分,分别为CSP-SAⅠ、CSP-SAⅡ、CSP-WAⅠ、CSP-HTⅡ,并测定了分子量及其分子量散布。第二部分锁阳多糖的结构表征研讨使用FT-IR,GC-MS,1D-NMR,2D-NMR,AFM和TG-DSC全面表征了提取的锁阳多糖。归纳表征成果,CSP-SAⅠ为直链葡聚糖,并确认了其或许的初级结构。CSP-SAⅡ为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成的杂多糖,分支度为21%,并得到了其或许的初级结构。CSP-WAⅠ首要是由葡萄糖组成的杂多糖,含微量阿拉伯糖、木糖及半乳糖,并得到了其或许的初级结构。CSP-HTⅡ除了含有鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖之外,还含有一定量的非糖物质。第三部分锁阳多糖改进Hep G2细胞胰岛素反抗的构效联系研讨调查了细胞水平不同提取办法、不同分子量、含/不含游离蛋白的锁阳多糖的毒性和降糖效果。经过树立肝癌细胞胰岛素反抗模型,研讨了锁阳多糖改进Hep G2细胞胰岛素反抗的构效联系。在细胞毒性方面,发现盐提锁阳多糖CSP-SA对细胞的毒性较大;尤其是中分子量的CSPM-SA在中、高剂量时均可明显影响Hep G2细胞生机;含游离蛋白水提锁阳多糖CSPpro-WA也具有较明显的细胞毒性。在促进细胞(IR状况)葡萄糖耗费效果上,水提锁阳多糖CSP-WA的效果与阳性对照药物二甲双胍适当,可明显改进Hep G2肝癌细胞的胰岛素反抗状况。研讨发现,不同办法提取的锁阳多糖中,水提法效果较佳,且其促进葡萄糖耗费效果呈剂量相关;低分子量的多糖在促进细胞葡萄糖耗费效果上效果相对较好;不含游离蛋白水提锁阳多糖与含蛋白样品比较,对促进Hep G2肝癌细胞葡萄糖耗费效果更好。第四部分锁阳多糖对糖尿病大鼠降血糖效果研讨使用链脲佐菌素(STZ)诱导树立糖尿病大鼠模型,经过测定血糖、体重、饮水、饮食、血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低/高密度脂蛋白(LDL和HDL)水平,调查了水提锁阳多糖(CSP-WA)对糖尿病大鼠的降血糖效果。研讨发现,CSP-WA可明显下降糖尿病大鼠的血糖水平,减轻由糖尿病引起的“多饮、多食、体重削减”等症状,能使糖尿病引起的高胰岛素水平下降,并使其代谢水平趋于正常。一起可明显下降糖尿病大鼠血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平,然后改进糖尿病大鼠的脂代谢水平,减轻相关症状。第五部分纳米钯的锁阳多糖微波组成及其在葡萄糖浓度监测中的使用选用盐提锁阳多糖(CSP-SA)作为复原剂,微波效果下复原醋酸钯制备纳米钯资料,并将其使用于非酶葡萄糖检测。研讨发现,制备的钯纳米颗粒吸附在锁阳多糖上构成复合结构(Pd-CSP),多糖在其间起了复原和安稳钯纳米颗粒的效果。组成的钯纳米颗粒具有较好的分散性和较小的粒径,制备的传感电极在血糖监测中表现出较好的呼应性,较高的灵敏度,优异的抗干扰才能以及安稳性。
【学位颁发单位】:西北师范大学
【学位等级】:博士
【学位颁发年份】:2016
【分类号】:TQ464.1;TB383.1

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